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雙光束紫外分光光度計(jì)的工作原理與操作技巧

更新時間:2025-06-22點(diǎn)擊次數(shù):164
  在化學(xué)、生物、醫(yī)藥等科研領(lǐng)域,雙光束紫外分光光度計(jì)憑借其高精度與高可靠性,成為分析物質(zhì)成分與結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵儀器。
  其工作原理基于朗伯-比爾定律,即溶液對特定波長光的吸光度與溶液中吸光物質(zhì)濃度及液層厚度成正比。雙光束設(shè)計(jì)是核心特色,儀器內(nèi)部分為參比光束與樣品光束兩大光路。光源發(fā)出的紫外光經(jīng)分光系統(tǒng)分成兩束,一束通過放置空白參比溶液的參比池,另一束穿過待測樣品池,兩束光經(jīng)光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換為電信號后,計(jì)算器自動對比兩者強(qiáng)度差異,從而精準(zhǔn)扣除參比溶液對光的吸收、散射等非目標(biāo)因素干擾,直接得出樣品對各波長光的真實(shí)吸光度,構(gòu)建準(zhǔn)確的吸收光譜圖。
 

雙光束紫外分光光度計(jì)

 

  操作技巧方面,開機(jī)預(yù)熱至關(guān)重要,需按說明書要求時長預(yù)熱儀器,確保光源穩(wěn)定、電子元件達(dá)工作狀態(tài),保障測量精度。樣品制備要精細(xì),保證參比溶液與待測液除目標(biāo)溶質(zhì)外其他成分一致、濃度準(zhǔn)確,且液面高度符合要求,避免因液面差引起光線折射差異。測量時,波長選擇應(yīng)依據(jù)樣品特性,先粗測確定吸收峰大致范圍,再精細(xì)掃描,于最大吸收波長處測定,能提升靈敏度。狹縫寬度調(diào)節(jié)有講究,過寬降低分辨率,過窄則光強(qiáng)不足,依樣品光譜復(fù)雜程度與所需靈敏度權(quán)衡設(shè)定。此外,定期校準(zhǔn)儀器不可少,用標(biāo)準(zhǔn)溶液校驗(yàn)吸光度準(zhǔn)確性,及時更換老化光源、清潔光學(xué)元件,維持儀器高性能,讓雙光束紫外分光光度計(jì)在科研分析中持續(xù)發(fā)揮精準(zhǔn)作用。

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